李芷晴从小在荔枝角长大，曾就读天主教善导小学（1999至2005年[2]）及圣母玫瑰书院（2005至2010年[3]、中五）[4]，2010至2012年转到玫瑰岗学校完成高考课程[5]；与同为无线电视艺人的朱斐斐是同班同学[6]。2012年取得证书后，她先升读红磡香港专上学院设计学副学士（视觉传达设计）课程[7]，2014年再以衔接形式继续修读两年香港中文大学艺术系[7]；2015年曾替港铁公司制作以小学生为对象的桌上游戏及动画教材，并于在校期间透过中大文物馆开画展[8][9]，2017年毕业后曾当过设计师及视觉艺术导师[10][11]。
2018年，李芷晴参加《2018年度香港小姐竞选》[12]，随后加入无线电视，签约成为旗下经理人合约艺员，主要担任节目主持，同年10月入读三个月的短期无线电视艺员训练班。翌年，她在处境剧《爱·回家之开心速递》中饰演香港岛大学学生“Fanny”一角而受到注目[11][13]，同年10月中，与黄晓明一起主持 J2台《六合彩》搅珠环节，并跟其他艺员同事一起经营 YouTube 游戏及短剧频道“黑马 Hak Maa”[14][15]。2021年，她于《万千星辉贺台庆》内夺得38万元大奖。